[動物實驗] - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)

實驗收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

服務(wù)介紹：

    蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics） 一詞，源于蛋白質(zhì)（Protein） 與 基因組學(xué)（Genomics） 兩個詞的組合，是大規(guī)模、高通量地研究一個細(xì)胞、組織或物種中表達(dá)的全套蛋白質(zhì)的學(xué)科。基于近年來質(zhì)譜技術(shù)的普及和發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的重要部分。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以對生物樣本中蛋白質(zhì)進(jìn)行大規(guī)模鑒定和定量，進(jìn)而從高通量數(shù)據(jù)中挖掘有用信息，為研究提供線索和方向。

　   目前蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域最CHENGSHU的即為（shotgun），即從樣品中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)過還原、烷基化、酶解等步驟變?yōu)殡亩位旌衔铮俳?jīng)過電噴霧進(jìn)入質(zhì)譜中掃描，得到質(zhì)譜圖，通過軟件和數(shù)據(jù)庫進(jìn)行解析，得到相應(yīng)的蛋白質(zhì)信息。     主要設(shè)備：質(zhì)譜儀 Thermo Q Exactive / AB Secix 5600+     蛋白質(zhì)組學(xué)是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征，如表達(dá)水平，蛋白間互作，翻譯后修飾，從而發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育、生長期和不同生理、病理條件下的特點，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和疾病機(jī)理研究中有著重要作用。

實驗結(jié)果展示：

實驗流程：

　　樣品保存運(yùn)輸

　　1、膠點/膠條樣本
　　①蛋白量大于100ng，4℃保存，冰袋運(yùn)輸。
　　②收集時，用雙蒸水對膠塊進(jìn)行清洗，采用干凈刀片將目的條帶區(qū)域（避免帶入空白或非目的區(qū)域）切下，裝入EP管中保存。
　　③考染膠條，需要條帶肉眼清晰可見，銀染膠條不建議進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定（銀染需專用質(zhì)譜兼容試劑盒銀染）。
　　④不同條帶不建議混合處理，避免干擾。
　　⑤提供樣本時需提供膠塊考染圖和樣品取點圖。
　　2、蛋白溶液樣本
　　①蛋白質(zhì)鑒定所需蛋白量至少大于10ug，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②定量蛋白質(zhì)組學(xué)所需蛋白量大于100ug，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　③修飾蛋白質(zhì)組學(xué)所欲蛋白量大于5mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　④建議測定蛋白濃度后，液氮速凍，避免蛋白降解，另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度，方便實驗室收到后進(jìn)行后續(xù)處理。
　　⑤樣本若為IP實驗后磁珠-抗體-蛋白復(fù)合物，注意不要加入loading buffer，應(yīng)采用wash buffer清洗后，離心去掉上清，重復(fù)三次，再使用PBS沖洗磁珠三次，去上清，收集磁珠沉淀。
　　3、細(xì)胞樣本
　　①細(xì)胞量1x107個，收集細(xì)胞沉淀，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②收集時，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。
　　4、血清樣本
　　①樣本量500uL，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②樣本應(yīng)盡量避免溶血。
　　5、血漿樣本
　　①樣本量500uL，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②樣本應(yīng)盡量避免溶血。
　　6、尿液樣本
　　①樣本量2mL，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②樣品應(yīng)盡量避免帶入糞便殘渣。
　    7、動物組織樣本
　　①樣本量300mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。　　
　　②收集時，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面血液，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結(jié)冰。
　　③固定液浸泡過的樣本無法進(jìn)行檢測。
　　8、植物組織樣本
　　①樣本量500mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②收集時，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結(jié)冰。　
　　③固定液浸泡過的樣本無法進(jìn)行檢測。
　　9、微生物樣本
　　①樣本量干重200mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②收集時，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。